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LED生物熒光顯微鏡與普通顯微鏡相比主要有以下區(qū)別
來源:技術(shù)文章    更新時間:2022-05-06    瀏覽:878次
       LED生物熒光顯微鏡是目前在光鏡水平對特異蛋白質(zhì)等生物大分子定性定位研究的最有力工具之一。熒光顯微鏡技術(shù)主要是用于檢測細胞上的特異熒光材料,與普通光學顯微鏡不同的是熒光顯微鏡增加了兩套濾光片。第一套稱為激發(fā)光濾片,裝在光源和樣品之間,只有那些能激發(fā)熒光材料發(fā)光的特定波長的光才能通過。第二套稱為阻斷濾片,裝在物鏡和目鏡之間,只讓燃料所發(fā)出的熒光通過。在黑暗背景的襯托下,發(fā)出熒光的樣品很容易被觀察。
  熒光顯微鏡技術(shù)包括免疫熒光技術(shù)和熒光素直接標記技術(shù)。例如,將標記熒光素的純化肌動蛋白顯微注射入培養(yǎng)細胞中,可以看到肌動蛋白分子組裝成肌動蛋白纖維。可將產(chǎn)生熒光的綠色熒光蛋白(greenfluorescent,GFP)基因與某種蛋白質(zhì)基因融合,在表達這種融合蛋白的細胞中,便可直接在活體狀態(tài)下觀察到該蛋白在活細胞內(nèi)的動態(tài)變化。不同熒光素的激發(fā)波長范圍不同,所以同一樣品可以用兩種以上的熒光素標記,同時顯示不同成分在細胞中的定位。
  LED生物熒光顯微鏡多采用200W的超高壓汞燈作光源,它是用石英玻璃制作,中間呈球形,內(nèi)充一定數(shù)量的汞,工作時由兩個電極間放電,引起水銀蒸發(fā),球內(nèi)氣壓迅速升高,當水銀*蒸發(fā)時,達到50~70個標準大氣壓力,這一過程一般約需5~15min。

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