高能熒光顯微鏡是利用一個(gè)高發(fā)光效率的點(diǎn)光源,經(jīng)過(guò)濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長(zhǎng)的光(如紫外光3650入或紫藍(lán)光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過(guò)物鏡和目鏡的放大進(jìn)行觀察。這樣在強(qiáng)烈的對(duì)襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認(rèn),敏感性高,主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究。
鑒于發(fā)光水平較低,物鏡在顯微鏡中的作用至關(guān)重要,因?yàn)樗菑臉悠分惺占獾奈镧R功能。物鏡接受的光錐角度由物鏡的數(shù)值孔徑?jīng)Q定。在透射光熒光顯微鏡中,到達(dá)眼睛或其他探測(cè)器的光強(qiáng)度直接變化為物鏡和聚光器的數(shù)值孔徑的平方與總放大倍數(shù)的平方成反比。
高能熒光顯微鏡的規(guī)則是保持光學(xué)元件*沒(méi)有灰塵,污垢,油,溶劑和任何其他污染物,顯微鏡應(yīng)保存在低振動(dòng)無(wú)煙室內(nèi),盡可能清潔并且對(duì)循環(huán)空氣的干擾小。不使用時(shí),請(qǐng)?jiān)陲@微鏡上使用防塵罩,并將所有配件放在不透氣的容器中,避免使用腐蝕性溶劑清潔顯微鏡的任何部分,并僅使用稀釋的肥皂水清潔非光學(xué)表面。
高能熒光顯微鏡切勿以高壓力(包括鏡頭紙)在鏡頭表面上拖動(dòng)任何物體,以避免在表面上引入非常細(xì)小的劃痕,使用專(zhuān)為光學(xué)表面設(shè)計(jì)的溶劑清潔鏡頭,或在緊急情況下使用無(wú)水乙醇清潔鏡頭。避免使用其他溶劑,因?yàn)樗鼈兛赡軙?huì)與玻璃上的光學(xué)涂層反應(yīng)。在用溶劑清潔之前,用壓縮氣體對(duì)鏡頭表面進(jìn)行除塵,以去除松散的顆粒,用鏡頭紙擦去多余的溶劑,讓鏡頭*干燥,重復(fù)此過(guò)程。